
乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒
一、 测定原理:
乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase LDH)能催化乳酸生成丙酮酸,丙酮酸与2,4-硝基苯肼反应生成丙酮酸二硝基苯腙,在碱性溶液中呈棕红色,通过比色可求出酶活力。
二、试剂盒组份
组份 | KGT02424(24 assays) | KGT02448(48 assays) | 保存条件 |
Buffer A | 15ml | 30ml | |
试剂 B | 2支 | 3支 | 冷冻保存 |
Buffer C | 15ml | 30ml | 室温避光 |
Buffer D( | 15mL | 30ml | 密封保存 |
丙酮酸钠标准品(2μmol/L) | 1支 | 1支 | - |
注意事项
1.试剂 B 工作液配制:
24 assays: 用时每支加1.95ml蒸馏水;溶解后冷冻保存期为二周。
48 assays: 用时每支加1.3ml蒸馏水;溶解后冷冻保存期为二周。
2.Buffer D工作液配制:
24 assays: 用前用蒸馏水稀释10倍配制成0.4mol/L NaOH溶液,用多少配多少,密封保存。
48 assays: 用前用蒸馏水稀释10倍配制成0.4mol/L NaOH溶液,用多少配多少,密封保存。
三、操作步骤
1. 用前请将样本及试剂放置至室温,按下表步骤进行检测
试剂 | 标准管 | 标准空白管 | 测定管 | 测定空白管 |
2μmol/L丙酮酸钠标准品(mL) | a* |
|
|
|
蒸馏水(mL) | 0.05 | 0.05+a* |
| 0.05 |
样品(mL) |
|
| a* | a* |
Buffer A(mL) | 0.25 | 0.25 | 0.25 | 0.25 |
试剂 B 工作液(mL) |
|
| 0.05 |
|
混匀, | ||||
Buffer C(ml) | 0.25 | 0.25 | 0.25 | 0.25 |
混匀, | ||||
Buffer D工作液(mL) | 2.5 | 2.5 | 2.5 | 2.5 |
混匀,室温放置3分钟,440nm,蒸馏水调零,
*参考取样量:0.2%小鼠脑组织匀浆取10~50μl,大鼠血清取10~30μl。若样本中LDH酶活力太大,可将样本用生理盐水稀释后再测。
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