冻存样本核蛋白提取试剂盒
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E-mail: tosciencebio@gmail.com
产品组成：
规格 50T 100T
提取液A 10ml 20ml
提取液B 10ml 20ml
蛋白酶抑制剂混合物 250ul 500ul
储存条件：
蛋白提取液2-8℃保存；蛋白酶抑制剂-20℃保存。
有效期：
一年。
注意事项：
● 本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管
底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清
洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
产品简介：
通善冻存样本核蛋白提取试剂盒适用于从各种经过冻存的细胞和各种实体组织中提
取核蛋白。提取过程简单方便，可在1 小时内完成。制备的核蛋白纯度高，较少交叉污染。
提取的蛋白可用于Western Blotting、转录活性分析、Gel shift 凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、
酶活性测定等蛋白研究。
产品特点：
1、使用方便。
2、将蛋白提取的时间缩短至 30 分钟-1 小时。
3、含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
4、紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
5、蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包
含7 种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。
该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白
酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
试剂盒以外自备试剂和仪器
● 移液器、吸头 ● 离心机及离心管
● 涡旋振荡器 ● 冰箱，冰盒
使用方法：
使用注意事项：
旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
1. 提取液制备：每 200ul 冷的蛋白提取液A 和B 中分别加入2ul 蛋白酶抑制剂混
合物，混匀后置冰上备用。
2. 样本解冻后，取适量组织样本（细胞样本直接进行第4 步），加冷PBS，用组织
匀浆器匀浆①至无明显肉眼可见固体（或用液氮研磨），冰上静置5 分钟，小心
将上清吸入另一预冷的干净离心管。
3. 在 4℃，1000×g 条件下离心2-3 分钟，弃上清。
4. 每 100mg 组织样本或50ul 细胞压积中加入200μl 冷的提取液 A，高速涡旋振荡
15 秒，置冰上10 分钟。
5. 再次高速涡旋振荡 5 秒，然后在4℃，16000×g 条件下离心5 分钟。
6. 沉淀用 PBS 洗涤一次，然后在4℃，16000×g 条件下离心5 分钟，弃上清。
7. 在沉淀中加入 100μl 冷的提取液B，高速涡旋振荡15 秒。
8. 置冰上 40 分钟，每隔10 分钟高速涡旋振荡15 秒。
9. 在 4℃，16000×g 条件下离心10 分钟。
10. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。
11. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
Toscience®是上海通善生物科技有限公司（Shanghai Toscience Biotechnology Co., Ltd.）的自主产品品牌，通善生物是一家生产、研发和销售生物化学实验室全套用品（包括：生物、化学化工试剂，实验耗材，仪器设备等）的集约化供应商。
上海通善生物科技有限公司产品种类涉及分子生物学、细胞生物学、生物化学、生态学、劳防用品及食品检验等诸多领域的试剂、消耗产品和设备等，为科研单位、高校、制药企业等提供全方位的一站式实验解决方案。
其中美国透析实验用品、Millipore超滤管、韩国SPL细胞培养耗材、以色列BI细胞培养基、BD细胞培养产品、细胞分离液、微生物干粉培养基、OMEGA试剂盒、Abcam抗体、Santa Cruz抗体、R&D产品、pierce试剂盒、sigma试剂、Fisher蓝盖瓶、NUNC耗材、corning耗材、Axygen试剂盒和耗材是我们的优势产品。
Toscience®用于通善生物自主研发生产的细胞因子、不锈钢细胞筛、抗体、生化试剂等产品。
上海通善生物科技有限公司产品种类涉及分子生物学、细胞生物学、生物化学、生态学、劳防用品及食品检验等诸多领域的试剂、消耗产品和设备等，为科研单位、高校、制药企业等提供全方位的一站式实验解决方案。
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