核蛋白提取试剂盒

由于产品不断优化更新，请以实际收到的产品说明书为准！

产品简介：

本试剂盒提供全套试剂，适用于从细胞和动物组织制备核蛋白和胞浆蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。制备的核蛋白和胞浆蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。

产品组成：

使用方法：

A． 细胞蛋白提取

1.       取5-10×10⁶个细胞，在4℃，500×g条件下离心2-3分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。

2.       用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。

3.       每20ul细胞压积中加入200μl冷的Buffer A，2ul蛋白酶抑制剂混合物，高速涡旋振荡15秒，置冰上10分钟。

4.       再次高速涡旋振荡5秒，然后在4℃，16000×g条件下离心5分钟。

5.       快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到胞浆蛋白，请置于冰上或-80℃冰箱保存备用。

6.       在沉淀中加入200μl冷的Buffer B，2ul蛋白酶抑制剂混合物，高速涡旋振荡15秒。

7.       置冰上40分钟，每隔10分钟高速涡旋振荡15秒。

8.       在4℃，16000×g条件下离心10分钟。

9.       快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。

B． 组织蛋白提取

1.       取适量组织样本剪碎，加冷PBS，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体（或用液氮研磨），冰上静置5分钟，小心将上清吸入另一预冷的干净离心管。

2.       在4℃，500×g条件下离心2-3分钟，弃上清。

3.       按照细胞蛋白的提取方法的第3步骤往下操作即可。

上述蛋白提取物请分装后于-80℃冰箱保存备用。

注意事项：

1.     实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。

2.     整个过程须保持样品处于低温状态。

储存条件：

-20℃保存。

有效期：

一年。