总蛋白提取试剂盒

由于产品不断优化更新，请以实际收到的产品说明书为准！

产品简介：

本试剂盒提供全套试剂，适用于从各种原代或传代细胞和各种实体软组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等哺乳动物组织中提取总蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。本试剂盒含有的独特变性剂能够溶解细胞膜包括细胞质膜和核膜。提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫共沉淀等蛋白研究。

产品组成：

使用方法：

A． 细胞总蛋白提取

1.       裂解液制备：每500ul冷的Buffer I中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。

2.       取5-10×10⁶个细胞，在4℃，1000rpm条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞

3.       用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。

4.       每5×10⁶个细胞中加入500ul冷的裂解液，混匀后，在4℃条件下振荡15-20分钟。

5.       在4℃，14000rpm条件下离心15分钟。

6.       快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到总蛋白。

B． 组织总蛋白提取

1.       裂解液制备：每500ul冷的Buffer I中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。

2.       取100mg组织样本剪碎，加入裂解液，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。

3.       将组织匀浆吸入另一预冷的干净离心管中，在4℃，10000rpm条件下离心5分钟。

4.       将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到总蛋白。

上述蛋白提取物请分装后于-80℃冰箱保存备用。

注意事项：

1.     实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。

2.     整个过程须保持样品处于低温状态。

储存条件：

-20℃保存。

有效期：

一年。