透析一个样品需要多少体积的透析缓冲液？缓冲液置换频率怎么安排？

透析缓冲液的体积越大，小分子扩散的驱动力越大。我们一般推荐缓冲液和样品的体积比为100:1，最佳为500：1。当扩散速率降低，膜两侧溶液趋于平衡时，通过置换缓冲液，可维持小分子扩散驱动力和透析速率。我们一般推荐在12-24小时内，置换缓冲液2到3次，具体安排如下：

第一次缓冲液置换：透析开始后2-3小时

第二次缓冲液置换：透析开始后4-5小时

最后一次缓冲液置换：透析隔夜之前